金丝桃苷 | 482-36-0

金丝桃苷简介

金丝桃苷，又名槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷。属于黄酮醇苷类化合物。苷元为槲皮素，糖基为吡喃半乳糖，由槲皮素的3位O原子以β糖苷键与糖基相连。金丝桃苷分布广泛，具有抗炎、解痉、利尿、止咳、降压、降低胆固醇、蛋白同化、局部和中枢镇疼以及对心、脑血管的保护作用等多种生理活性，是一种重要的天然产物。

金丝桃苷理化性质

淡黄色针状结晶。熔点227～229℃，旋光度-83°（c=0.2，吡啶）易溶于乙醇、甲醇、丙酮和吡啶，通常条件下稳定。与盐酸-镁粉反应，生成樱红色，三氯化铁反应显绿色，α-萘酚反应阳性。

金丝桃苷的药理作用

1、金丝桃苷有显著的局部镇痛作用,镇痛效果弱于吗啡,强于阿司匹林,且没有依赖性,是一种新型局部镇痛药.被称为“第三类镇痛药”研究发现金丝桃苷的镇痛作用是通过减少痛神经末梢Ca2 而产生的，同时发现金丝桃苷可抑制高钾诱发的ca2 内流，说明金丝桃苷对神经组织ca 通道亦有阻滞作用，并进一步提出金丝桃苷可能是ca2 通道阻滞剂。临床观察显示，金丝桃苷注射液治疗原发性痛经，疗效与阿托品相似，除少数嗜睡副作用外，无阿托品常见的心动过速、瞳孔散大和灼热感等不良反应，是一种理想的解痉、镇痛药。

 2、金丝桃苷对心肌缺血再灌,脑缺血再灌,脑梗塞都显示良好的保护作用。
3、金丝桃苷具有明显的抗炎作用:大鼠植入羊毛球后,每天20mg/Kg 腹腔注射7天,显著抑制发炎过程。
4、具有较强的止咳作用。
5、同化作用。
6、有较强的抑制眼醛糖还原酶的作用,可能对预防糖尿病性白内障有利。
7、对心肌缺血的保护作用

金丝桃苷可降低缺氧-再给氧引起的心肌细胞凋亡率，抑制乳酸脱氢酶的释放，提高心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌超氧化物歧化酶（SOD）的活力，降低丙二醛(MDA)的生成量，抑制血清中的心肌磷酸激酶（CPK）的升高，减少氧自由基和一氧化氮自由基的形成，从而保护心肌，减轻缺血-再灌注导致的心肌细胞损伤和心肌细胞的凋亡。

8、对脑缺血的保护作用

金丝桃苷能有效抑制缺氧缺糖-再灌注损伤后脑片甲躜（formazan）含量下降，增加缺血区脑片皮层和纹状体的存活神经元数目，使神经元细胞形态完整，分布良好。抑制缺氧缺糖-再灌注损伤诱导的神经元活性的降低。抑制SOD、LDH及谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）活性的下降。其作用机制可能与自由基清除，抑制Ca2 内流及抗脂质过氧化物形成等有关。

9、对肝、胃粘膜的保护作用

 金丝桃苷对肝组织和胃粘膜有明显的保护作用，同时桃金丝苷对乙肝病毒具有良好的治疗作用，但其抗病毒机制尚不清楚。其作用机制与抗氧化作用和促进N0水平恢复正常、提高SOD活性有关。

10、降血脂作用

 金丝桃苷能显著降低高脂小鼠血清Tc、升高HDL/TC比值，说明其具有降低胆固醇、调节血脂的作用，并且具有提高HDL和小鼠血清SOD活性的作用。这一作用可以明显降低高脂血症时超氧自由基对血管内皮的损伤，有利于过氧化脂质的分解和代谢，以保护血管内皮。

11、增强免疫功能

 金丝桃苷用于体内剂量在300 mg/kg和150 mg/kg时可明显抑制小鼠胸腺指数及脾T、B淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞吞噬功能；在59 mg/kg时则明显增强小鼠脾脏T、B淋巴细胞的增殖和腹腔巨噬细胞的吞噬功能。金丝桃苷体外剂量在50～6.25 ml时能显著促进脾T、B淋巴细胞的增殖，增强T淋巴细胞产生IL-2的能力，并有明显的量效关系；金丝桃苷6.25 g/ml时对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性粒细胞能力具有显著的增加作用，在12.5～3.12 μg/ml时对小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的能力具有显著的增加作用。

12、抗抑郁作用

 下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）激活是严重抑郁症患者常见的生物学变化，表现为促肾上腺皮质激素（ACTH）和皮质醇的分泌过多。金丝桃苷能调控HPA轴的功能，使ACTH和皮质酮水平下降，从而发挥抗抑郁的作用。

13、抗氧化作用

金丝桃苷具有很强的抗氧化作用，主要表现在自由基和降低脂质过氧化反应两方面。研究表明，金丝桃苷可以提高心肌超氧化物歧化酶活力，减少自由基和一氧化氮形成，降低丙二醛的生成量，金丝桃苷对心、脑及肝产生保护作用的同时，还能够显著清除自由基。

综上所述，金丝桃苷具有广泛的药理活性和潜在良好的应用前景，已越来越受到人们重视。但许多作用机制目前还不十分明确，限制其开发利用。其中研究和了解比较多的是其抗氧化及抗损伤作用，目前认为该作用可能与清除自由基及钙拮抗等机制有关，而近年发现的桃金丝苷抗乙肝病毒作用虽然有较大临床价值，但其作用靶点和作用机制至今尚未见报道。因此对金丝桃苷的研究还需进一步深入展开，从而使其尽早得到较好的开发利用。

 金丝桃苷天然来源

金丝桃苷广泛存在于各种植物体内，如金丝桃科、蔷薇科、桔梗科、唇形科、杜鹃花科、葵科、藤黄科、豆科以及卫矛科等的果实与全草中。Nair等早在1960年就从Redosierdog wood中分离得到Hyperin，其含量为0.075%。国内王先荣等从照山白中分离得到Hyperin，但其含量均未见报道。周心艳等探讨了从贯叶连翘（Hypeticum Perforatum）中提取Hyperin的工艺过程。他们的研究表明，用95%乙醇作为溶剂提取金丝桃苷，在真空度34.66～8 kPa 下加入少量（NH4）2SO4浓缩，喷雾干燥，可获得金丝桃苷含量为0.87%的产品。

胡氏等测得新疆贯叶连翘中金丝桃苷的含量为0.254%～0.266%。郑氏等测得不同地区的菟丝子中金丝桃苷的含量为0.076%～0.102%。杨氏等测得江苏江堰黄蜀葵花中金丝桃苷含量为1.12%；江苏兴化黄蜀葵花中金丝桃苷含量0.98%；河北邢台黄蜀葵花中金丝桃苷含量1.03%。张氏等测得山楂提取物中金丝桃苷的含量为1.95～3.24mg/g。潘氏等测得吴茱萸中金丝桃苷的含量为0.636～0.682 mg/g。韩氏等测得罗布麻叶金丝桃苷平均含量为0.71%。胥氏等测得扁蓄中Hyp的含量为0.011%～0.017%。王氏等测得不同地区的水芹金丝桃苷含量为0.16～0.29 mg/g。

金丝桃苷制备工艺

粗提

 可采用用乙醇热回流提取、甲醇热回流提取、乙醇超声提取、甲醇超声提取等方法从生药粉末中对金丝桃苷进行粗提。

分离纯化

使用硅胶柱色谱对粗提物进行分离，采用石油醚-丙酮、氯仿-丙酮或氯仿-甲醇-水梯度洗脱，改变洗脱条件，可达到较好的分离效果，所得产品再经重结晶得到高纯度金丝桃苷。

合成方法

 采用半合成法，以易于得到且较为便宜的芦丁为原料，经苄基化、酸水解、糖苷缩合、脱乙酰基和脱苄基五步反应，得到金丝桃苷。

1、7,3',4'-三-O-苄基槲皮素的制备

芦丁在真空下100℃干燥6小时，脱去3个结晶水。在氮气保护下，将干燥后的芦丁溶于无水DMF，加入碳酸钾，搅拌1小时后，缓慢滴人新蒸的溴化苄，然后40℃反应3小时。冰浴下用10%的乙酸将反应液调至pH6，再向其中加入蒸馏水，离心弃去上清液，沉淀为苄基化的芦丁。向沉淀中加入体积比为60∶9的乙醇和盐酸，缓慢加热至70℃使固体完全溶解，10分钟后溶液中开始析出沉淀，2小时后反应结束。反应液以冰浴冷却，低温下滤出沉淀，用少量冷蒸馏水洗涤沉淀，三氯甲烷/乙醇重结晶，得到7,3',4'-三-O-苄基槲皮素。

2、7,3',4'-三-O-苄基槲皮素-3-O-2,3,4,6-四乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷的制备

7,3',4'-三-O-苄基槲皮素和2,3,4,6-四乙酰基-α-D-溴代吡喃半乳糖、四丁基溴化铵（TBAB）溶解于CHCL3中，加入碳酸钾溶液，45℃搅拌反应12小时，静置分层，有机相水洗至中性，无水硫酸镁干燥，减压除去溶剂，经硅胶柱层析（甲苯-乙酸乙酯/4∶1）分离得7,3',4'-三-O-苄基槲皮素-3-O-2,3,4,6-四乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷。

3、金丝桃苷的制备

7,3',4'-三-O-苄基槲皮素-3-O-2,3,4,6-四乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷溶于二氯甲烷，加入1mol/L甲醇钠的甲醇溶液。在氮气保护下搅拌反应6小时。减压蒸除甲醇和二氯甲烷，5%的HC1酸化至pH5，静置，析出黄色的固体，冷却至O℃，滤过，冷的蒸馏水洗涤固体3次，干燥得黄色固体。将此黄色固体溶于无水乙醇和二氧六环，加入10%Pd/C，室温常压下于氢气保护下反应4小时，滤过除去Pd/C，并用少量的乙醇洗下吸附的产物。减压浓缩得到金丝桃苷。